Système multiphotonique à feuillet de lumière Bessel
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Unicité
Comment fonctionne le système?
La microscopie à feuillet de lumière est généralement réalisée à l’aide d’un faisceau gaussien visible, dont le balayage est parallèle avec l’unité de détection. Comme la profondeur de champ et la taille du faisceau sont étroitement liées, la technologie permet souvent difficilement d’imager un échantillon plus grand et d’augmenter le champ d’illumination (déterminé par la longueur du faisceau), sans compromettre la résolution axiale (déterminée par l’épaisseur du feuillet de lumière).
Pour surmonter ce défi, nous utilisons une lentille Axicon pour former un faisceau fin en forme d’aiguille (faisceau de Bessel) qui, lorsque balayé à très grande vitesse le long d’un axe, forme un feuillet de lumière. Le principal avantage de cette stratégie réside dans sa capacité à créer un feuillet de lumière d’épaisseur uniforme le long de son profil longitudinal et à fournir des images de grand volume dont la résolution isotrope permet la visualisation de structures subcellulaires.
Système à feuillet de lumière Bessel de Bliq. © Cléophace Akitegetse, Université Laval, 2018.
Diagramme de la ligne focale de Bessel. © Cléophace Akitegetse, Université Laval, 2018.
Imagerie de grands échantillons
Obtenez des images en résolution subcellulaire, dotées d’un grand champ de vision
Le système à feuillet de lumière Bessel de Bliq offre un champ de vision suffisamment large pour imager une section du cerveau d’une souris tout en maintenant une résolution isotrope de l’ordre du micromètre. De plus, le profil d’illumination d’un faisceau de Bessel reste inchangé lorsqu’il y a une obstruction dans l’échantillon, ce qui réduit considérablement l’ombrage par rapport à la technologie utilisant un faisceau gaussien. Ainsi, aucune donnée n’est perdue.
Neurones dopaminergiques marqués avec la tyrosine hydroxylase dans un cerveau de souris P1 éclairci par iDisco. Offerte par le Dr Martin Lévesque, Centre de recherche CERVO, Université Laval.
Diagramme du faisceau de Bessel résultant de l’utilisation d’un Axicon (A) et du faisceau de Bessel se reformant après obstruction (B). Ref. : Egmason // CC-BY-SA-3.0
Faible photodommage
Réalisez une imagerie multiphotonique profonde avec une faible phototoxicité
Profitez de tous les avantages de la microscopie multiphotonique, notamment la réduction du photoblanchiment et du photodommage, ainsi que la suppression de la fluorescence hors foyer.
Légende : Projection d’intensité maximale d’images exprimant la desmine-594 dans un cœur de souris éclairci par iDISCO. © Cléophace Akitegetse, Université Laval, 2018.
Haute qualité
Obtenez un faisceau de Bessel à haute résolution axiale
Bliq sélectionne soigneusement des lentilles Axicon de haute qualité pour générer un faisceau de Bessel long, fin et uniforme qui fournit une résolution axiale allant jusqu’à 2μm sur tout le champ de vision.
Vaisseaux sanguins marqués avec CD31 dans le cortex éclairci d’une souris adulte. Offerte par le Dr Martin Lévesque et la Dre Caroline Ménard, Centre de recherche CERVO, Université Laval.
Chambres personnalisées
Utilisez une variété d’échantillons avec nos chambres personnalisées de grande taille
La chambre d’imagerie de Bliq vous permet d’imager des échantillons allant jusqu’à 40 mm x 100 mm x 7 mm, sans avoir à les faire pivoter. Notre équipe est à votre entière disposition pour concevoir et produire des chambres personnalisées selon vos besoins précis.
Spécifications
Objectif d'excitation | 20X: NA 0.4, WD 25.5mm |
Objectif de détection | 10X: NA 0.42, WD 15mm |
Zoom optique | De 8X à 16X |
Résolution (8X) | - Latérale: 790nm - Axiale: 2μm |
FOV (8X) | 1.6mm x 1.6mm |
Vitesse d'acquisition par FOV | Jusqu'à 100 images par seconde (temps d'exposition 10ms) |
Dimension de la chambre | 6cm x 4cm x 3cm. Chambres sur mesure également disponibles |
Dimension de l'échantillon | Jusqu'à 14mm x 100mm x 25mm (sans rotation du spécimen) |
Détection | - Hamamatsu Orca Flash 4.0 100 images par seconde, 2048 x 2048 (autres options disponibles) - Détection à 1 canal ou à 2 canaux simultanés |
Source laser : Laser IR amplifié ultra-rapide | - 650nm à 900nm et 1200nm à 2500nm - Puissance de sortie @ 800nm : > 3W - Énergie par impulsion: >3μJ - Durée d'impulsion: <100fs - Taux de répétition : 1MHz |
Logiciel et ordinateur | - Logiciel d'acquisition Nirvana de Bliq - Apple iMac Pro, 4,2GHz, 128GB SDRAM, 4TB SSD, VEGA 16GB video, 80TB de stockage, moniteur 27″ 5K |
Milieu d'incubation | Méthodes à base d'hydrogel, aqueuse et de solvant |